大鼠肺成纖維細(xì)胞原代分離培養(yǎng)方法優(yōu)化
摘要: 目的:探索大鼠肺成纖維細(xì)胞(PFs)快速分離培養(yǎng)方法,為肺纖維化體外研究提供更為科學(xué)便利的技術(shù)支持。方法:取新生SD大鼠肺組織,采用Ⅱ型膠原酶/胰酶混合酶消化法,應(yīng)用顯微鏡對每次組織消化細(xì)胞懸液及沉淀進(jìn)行觀察分析,選擇性收集細(xì)胞懸液,同時對細(xì)胞差速貼壁時間進(jìn)行梯度分組,優(yōu)化最佳細(xì)胞貼壁時間節(jié)點(diǎn),應(yīng)用考馬斯亮藍(lán)染色觀察細(xì)胞形態(tài)的均一性,應(yīng)用波形蛋白標(biāo)記鑒定PFs的純度,應(yīng)用α-平... ...
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